负染色

通过使用负染色,最好地揭示颗粒状标本(病毒,细菌,亚细胞组分)的结构细节。该过程围绕着具有电子密集材料的颗粒,并通过染色(暗)和样本(光)之间的对比度露出表面。由于这与正常的阳性染色效果相反,因此它被称为负染色。

常见的阴性染色是在水中的1%磷钨酸(PTA)的溶液,用1N NaOH调节至pH。

1.将一滴稀释的材料放在Formvar和碳覆盖的网格上。

2. 30-60秒后,用滤纸向多余的液体呈现。

3.添加一滴PTA解决方案。

4. 1分钟后,用滤纸呈现过量。

5.让网格风干。

6.在透射电子显微镜中检查。

您可能会尝试将样本和PTA混合在一起,并添加一个丢弃或其他组合。避免浓度的材料浓度,避免使用在电子束中可能“烹饪”的缓冲液或化合物(例如蔗糖)。

替代污渍包括:乙酸铀酰,甲酸甲酯和钼酸铵。

如果样品需要缓冲液,则建议乙酸铵,因为它不会与大多数负污渍反应。